Προσμίξεις σεμαγλουτίδης

Προσμίξεις σεμαγλουτίδης|Έλεγχος ακαθαρσιών σιμεγλουτίδης|Προσαρμοσμένη σύνθεση και επιβεβαίωση δομής ακαθαρσιών|Επιστήμη-Πεπτίδιο

Έλεγχος προσμίξεων Soma Lutide (Simeglutide) - για GLP-1 μελέτη ποιότητας φαρμάκου, υποβολή γενικού φαρμάκου. Επιστήμη-Το πεπτίδιο παρέχει προσαρμοσμένη σύνθεση ακαθαρσιών που σχετίζονται με το Soma Lutide, συμπεριλαμβανομένων πεπτιδίων που λείπουν, οξειδωμένων ακαθαρσιών, δεδομένων απολέπισης λιπαρών οξέων, συνοδευόμενων προϊόντων απολέπισης από λιπαρά οξέα. Μπορούμε να υποστηρίξουμε την έρευνα προφίλ ακαθαρσιών σας. Καλώς ήρθατε να επικοινωνήσετε μαζί μας.

Το Semaglutide (γνωστό και ως Semaglutide) έχει πάρει φωτιά αυτά τα χρόνια. Η Novo Nordisk βασίζεται σε αυτό για να ωθήσει την αγοραία αξία στους δεύτερους, εγχώριους κατασκευαστές γενόσημων πεπτιδίων στον κόσμο, σχεδόν καθόλου, δεν το κοιτούν επίμονα. Η από του στόματος δοσολογική μορφή και η ενέσιμη μορφή δοσολογίας είναι όλες μεγάλες αγορές. Μετά τη λήξη της πατέντας, ποιος μπορεί να κάνει πρώτα την ποιοτική έρευνα, ποιος θα έχει την ευκαιρία να αρπάξει το πρώτο γενόσημο.

 

Ωστόσο, η ποιοτική μελέτη της σωματοστατίνης είναι, ειλικρινά μιλώντας, πιο δύσκολη από αυτή πολλών πεπτιδίων. Είναι ένα 31-πεπτίδιο με αλυσίδα λιπαρών οξέων (οκταδεκανοδιοϊκό οξύ) και συνδέτη PEG. Αυτή η δομή καθορίζει ότι το φάσμα ακαθαρσιών του είναι ιδιαίτερα πλούσιο - που λείπουν πεπτίδια, οξειδωμένες ακαθαρσίες, προϊόντα αποβολής λιπαρών οξέων, ακαθαρσίες που σχετίζονται με την αλυσίδα PEG, διμερή το καθένα πρέπει να έχει έναν έλεγχο, το καθένα πρέπει να είναι διαυγές. Ειδικά η αλυσίδα PEG, η οποία δεν βρίσκεται στα συνηθισμένα πεπτίδια, είναι μοναδική στο Somalutide.

 

Έχουμε συσσωρεύσει μεγάλη εμπειρία στη σύνθεση σύνθετων ακαθαρσιών πεπτιδίων. Έχουμε εξειδικευτεί στη μελέτη της σωματοστατίνης και γνωρίζουμε ποιες είναι οι δυσκολίες στο προφίλ προσμίξεων της και ποια είναι τα βασικά στοιχεία ελέγχου. Μπορούμε να προσαρμόσουμε τη σύνθεση διαφόρων στοιχείων ελέγχου προσμίξεων σεμαγλουτίδης σύμφωνα με τις ανάγκες σας, με δεδομένα δομικής επιβεβαίωσης και να σας βοηθήσουμε να καθορίσετε τη μέθοδο, έτσι ώστε να είναι λιγότερο πιθανό να σας χορηγηθεί συμπλήρωμα κατά την κατάθεση.

Η μοριακή δομή της σωματοστατίνης καθορίζει ότι το προφίλ ακαθαρσίας της είναι πολύ πιο περίπλοκο από αυτό των συνηθισμένων πεπτιδίων. Όταν κάνουμε μελέτες ακαθαρσιών, εστιάζουμε κυρίως σε αυτές τις κατηγορίες:

Λείπει πεπτίδιο
Τα 31 αμινοξέα, οποιοδήποτε από τα οποία παραλείπεται κατά τη διαδικασία σύνθεσης, είναι ακαθαρσία. Οι χρόνοι κατακράτησης των πεπτιδίων που λείπουν στην HPLC ήταν ευρέως κατανεμημένοι, με διαφορετική πολικότητα των πεπτιδίων που λείπουν σε διαφορετικές θέσεις. Μερικά λείπουν στο Ν-τελικό άκρο, άλλα στη μέση και μερικά κοντά στο σημείο προσκόλλησης λιπαρών οξέων. Λάβαμε μια παραγγελία από έναν πελάτη που ζήτησε μια ντουζίνα πεπτίδια που λείπουν σε διαφορετικές θέσεις για να εντοπίσουμε όλες τις πιθανές ακαθαρσίες που λείπουν στη διαδικασία τους.

Οξειδωτικές ακαθαρσίες
Το Somalutide έχει μεθειονίνη (Met) στην αλληλουχία του, η οποία είναι ευαίσθητη σε οξείδωση σε σουλφοξείδιο και στη συνέχεια σε σουλφόνη. Οι οξειδωμένες ακαθαρσίες εμφανίζονται συχνά σε μελέτες σταθερότητας και αναπτύσσονται μετά από κάποιο χρονικό διάστημα. Κάναμε μια σύγκριση, κάτω από επιταχυνόμενες συνθήκες για ένα μήνα, η κορυφή της οξείδωσης μπορεί να αυξηθεί σε περισσότερο από 0,3%, χωρίς έλεγχο.

Προϊόντα αποβολής λιπαρών οξέων
Η πλευρική αλυσίδα λιπαρού οξέος (οκταδεκανοδιοϊκό οξύ) της σωματοστατίνης συνδέεται με τη λυσίνη μέσω ενός συνδέτη και αυτή η τροποποίηση μπορεί να αποβληθεί εν μέρει κατά τη σύνθεση ή την αποθήκευση. Πιο προβληματικά, η αποβολή μπορεί να συμβεί σε διαφορετικές θέσεις - μεταξύ του λιπαρού οξέος και του συνδέτη και μεταξύ του συνδέτη και του πεπτιδίου - με αποτέλεσμα διαφορετικές ακαθαρσίες. Έχουμε συνθέσει αρκετές ακαθαρσίες που σχετίζονται με τα λιπαρά οξέα- για τους πελάτες μας, που κυμαίνονται από την πλήρη αποβολή έως ένα μικρό τμήμα.

ακαθαρσίες που σχετίζονται με την αλυσίδα PEG-
Αυτός είναι ο πιο συγκεκριμένος τύπος ακαθαρσίας στη σωματοστατίνη. Διαθέτει συνδέτη PEG (πολυαιθυλενογλυκόλη) και η αλυσίδα PEG μπορεί να σπάσει, να βραχυνθεί ή να πολυμεριστεί κατά τη διάρκεια της σύνθεσης, με αποτέλεσμα μια σειρά σχετικών ακαθαρσιών. Αυτές οι ακαθαρσίες δεν βρίσκονται σε συνηθισμένα πεπτίδια, αλλά είναι μοναδικές για τη σωματοστατίνη και είναι δύσκολο να μελετηθούν σε ποιοτικές μελέτες. Έχουμε κάνει διάφορες παραλλαγές διαγραφής αλυσίδας PEG, βράχυνσης αλυσίδας PEG και οξείδωσης αλυσίδας PEG.

Διμερή/πολυμερή
Δύο ή περισσότερα μόρια σωματοστατίνης συγκεντρώνονται για να σχηματίσουν ένα διμερές ή μεγαλύτερο. Το μοριακό βάρος του διμερούς είναι διπλάσιο από αυτό της κύριας κορυφής και είναι συχνά μια ευρεία κορυφή στην HPLC, επομένως πρέπει να διαχωριστεί και να καθαριστεί ειδικά πριν χρησιμοποιηθεί ως έλεγχος. Έχουμε κάνει την προετοιμασία των διμερών και χρειάστηκαν αρκετοί γύροι καθαρισμού για να επιτευχθεί καθαρότητα μεγαλύτερη από 95%.

Αποαμιδωμένες ακαθαρσίες
Η ασπαραγίνη (Asn) και η γλουταμίνη (Gln) αποαμιδιώνονται εύκολα υπό όξινες συνθήκες ή συνθήκες θέρμανσης, με αποτέλεσμα ισομερή. Υπάρχουν πολλά Asn και Gln στην αλληλουχία της σωματοστατίνης και η ακαθαρσία αποαμίδωσης εμφανίζεται συχνά στη δοκιμή εξαναγκασμένης αποδόμησης, επομένως το προϊόν ελέγχου πρέπει να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό της ακαθαρσίας.

Διαστερεοϊσομερή
Κατά τη διάρκεια της σύνθεσης μακράς αλυσίδας, μεμονωμένα αμινοξέα μπορεί να υποστούν ρακεμοποίηση, με αποτέλεσμα διαστερεοϊσομερή. Η περιεκτικότητα αυτού του είδους ακαθαρσίας συνήθως δεν είναι υψηλή, αλλά οι ειδικοί θα ρωτήσουν κατά τη δήλωση και είναι καλύτερο να έχετε ένα προϊόν ελέγχου για επιβεβαίωση.

Πολλές από αυτές τις ακαθαρσίες δεν μπορούν να αγοραστούν και πρέπει να συντεθούν κατά παραγγελία. Έχουμε ήδη κάνει πολλά έργα για την προσαρμογή των ακαθαρσιών σωματοστατίνης, καλύπτοντας όλες τις παραπάνω κατηγορίες.

Η διαγραφή της σειράς πεπτιδίων
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, με επιβεβαίωση MS και NMR. Έχουμε συνθέσει ένα σύνολο πεπτιδίων με απόσταση 5 αμινοξέων από το Ν-τελικό έως το C-τελικό.

Οξειδωτικές ακαθαρσίες
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95% και μπορούμε να παρέχουμε το φάσμα LC-MS για επιβεβαίωση του βαθμού οξείδωσης. Το σουλφοξείδιο και η σουλφόνη διαχωρίζονται με HPLC και μπορούμε να κάνουμε και τα δύο.

Προϊόντα αποβολής λιπαρών οξέων
Αυτή είναι η κύρια εστίαση των ακαθαρσιών Somalutide. Η αλυσίδα των λιπαρών οξέων μπορεί να αποσπαστεί πλήρως ή μερικώς. Μπορούμε να συνθέσουμε μια σειρά παραλλαγών για διαφορετικές θέσεις απόρριψης. Σε ένα από τα πιο περίπλοκα έργα που έχουμε κάνει ποτέ, ο πελάτης μας ζήτησε να συνθέσουμε μια ακαθαρσία με 6 άνθρακες που λείπουν από την αλυσίδα των λιπαρών οξέων και μας πήρε δύο μήνες για να το κάνουμε σωστά.

ακαθαρσίες που σχετίζονται με την αλυσίδα PEG-
Αυτή είναι μια από τις πιο δύσκολες ακαθαρσίες της σωματοστατίνης, και είναι επίσης η δύναμή μας. Η αλυσίδα PEG μπορεί να λείπει, να κοντύνει, να σπάσει, να οξειδωθεί και να παραχθούν διάφορες παραλλαγές. Κάναμε την ακαθαρσία με την αλυσίδα PEG να λείπει εντελώς (δηλ. απο-PEGυλιωμένη σωματοστατίνη), την παραλλαγή με το μήκος της αλυσίδας PEG μειωμένο στο μισό και το προϊόν με την αλυσίδα PEG οξειδωμένη. Στον πελάτη δόθηκαν αυτά τα στοιχεία ελέγχου και το φάσμα της ακαθαρσίας που σχετίζεται με το PEG-διαπιστώθηκε πλήρως.

Dimer
Διμερή που σχηματίζονται με διασταυρούμενη-σύνδεση ή μη-ομοιοπολικές αλληλεπιδράσεις μπορούν να παρασκευαστούν με διαφορετικές μεθόδους και να απομονωθούν και να καθαριστούν για να παρέχουν ελέγχους υψηλής καθαρότητας. Τα διμερή είναι επίπονο για τον καθαρισμό, αλλά έχουμε την εμπειρία να γνωρίζουμε πώς να διαχωρίζουμε τα μονομερή.

Αποαμιδωμένες ακαθαρσίες
Για τις θέσεις Asn και Gln στην αλληλουχία, μπορούμε να παρασκευάσουμε ελέγχους αποαμιδιωμένων ακαθαρσιών με εξαναγκασμένη αποικοδόμηση ή στοχευμένη σύνθεση. Η διαφορά στο μοριακό βάρος μετά την αποαμίδωση είναι μόνο 1, κάτι που δεν είναι εύκολο να διακριθεί από την MS, επομένως συνήθως χρησιμοποιούμε NMR ή ειδικές χρωματογραφικές συνθήκες για επιβεβαίωση.

Προσαρμοσμένες ακαθαρσίες Dther
Εάν βρείτε μια νέα άγνωστη ακαθαρσία στην έρευνά σας, μπορούμε να σας βοηθήσουμε να αναλύσετε τη δομή και να τη συνθέσετε. Στείλτε μας το δείγμα, θα κάνουμε την ανάλυση LC-MS, θα υποθέσουμε τη δομή, στη συνέχεια θα συνθέσουμε κατευθυντική σύνθεση και, στη συνέχεια, θα συγκρίνουμε τον χρόνο διατήρησης και το φάσμα μάζας για να επιβεβαιώσουμε τη συμφωνία. Έχουμε κάνει αυτή τη διαδικασία πολλές φορές και το ποσοστό επιτυχίας είναι αρκετά υψηλό.

Ανάπτυξη και επικύρωση αναλυτικής μεθόδου
Κατά τη ρύθμιση μιας μεθόδου HPLC ή LC-MS, απαιτείται έλεγχος ακαθαρσιών για εντοπισμό, προσδιορισμό διαχωρισμού, επαλήθευση γραμμικού εύρους και ανάκτηση. Χωρίς τον έλεγχο, λείπει ένα κομμάτι από την επικύρωση της μεθόδου. Πολλοί πελάτες μας ζητούν να κάνουμε μερικές βασικές ακαθαρσίες πρώτα για να ρυθμίσουμε τη μέθοδο και μετά να αναπληρώσουμε σιγά σιγά τις υπόλοιπες.

Ετερογενής φασματομετρία μάζας
Όταν δηλώνεται ένα γενόσημο φάρμακο, απαιτείται ολοκληρωμένη ποιοτική και ποσοτική ανάλυση των προσμείξεων διεργασίας και των προϊόντων αποδόμησης. Η θέση, το περιεχόμενο και η δομή κάθε ακαθαρσίας πρέπει να επιβεβαιώνονται από ένα προϊόν ελέγχου. Έχουμε δει τη δήλωση των πληροφοριών που στάλθηκαν για να συνθέσουμε, εννέα φορές στις δέκα είναι οι ακαθαρσίες αυτού του κομματιού δεν κατάλαβα.

Μελέτες σταθερότητας
Σε δοκιμές μακροπρόθεσμης σταθερότητας και επιταχυνόμενων δοκιμών, είναι απαραίτητο να καθοριστεί ποια προϊόντα υποβάθμισης είναι κυρίαρχα και ποια είναι η τάση στο περιεχόμενο. Με έναν έλεγχο ακαθαρσιών, είναι δυνατός ο ακριβής ποσοτικός προσδιορισμός και η παρακολούθηση. Ένας πελάτης έκανε τη σταθερότητα της προετοιμασίας της σωματοστατίνης και διαπίστωσε ότι μια κορυφή αποικοδόμησης αυξανόταν γρήγορα υπό επιταχυνόμενες συνθήκες, έτσι την αναλύσαμε με MS και τη συνθέσαμε για να επιβεβαιώσουμε τη δομή και, στη συνέχεια, ο πελάτης ένιωσε ανακούφιση που το ανέφερε.

Δοκιμή απελευθέρωσης παρτίδας
Μετά την εμπορευματοποίηση, κάθε παρτίδα API ή σκεύασμα πρέπει να ελέγχεται για την εν λόγω ουσία. Οι έλεγχοι ακαθαρσιών είναι απαραίτητα εργαλεία για τη δοκιμή απελευθέρωσης.

Πληροφορίες για δηλώσεις γενόσημων φαρμάκων
Οι μελέτες ακαθαρσιών αποτελούν βασικό τμήμα των πληροφοριών αρχειοθέτησης. Η παροχή πλήρους προφίλ ακαθαρσιών και δεδομένων ελέγχου μειώνει σημαντικά τον κίνδυνο απελευθέρωσης επανεξέτασης.

Περίπτωση 1: Φαρμακευτική εταιρεία, πρόγραμμα γενόσημων φαρμάκων Somalutide
Αναπτύσσουν μια γενική έκδοση της σωματοστατίνης και χρειάζονται ένα πλήρες σύνολο ελέγχων ακαθαρσιών για την επικύρωση της μεθόδου. Προσαρμόσαμε 15 ακαθαρσίες για αυτά: 6 πεπτίδια που λείπουν, 2 οξειδωμένες ακαθαρσίες, 1 διμερές, 2 προϊόντα απολέπισης λιπαρών οξέων, 3 ακαθαρσίες που σχετίζονται με την αλυσίδα PEG και 1 ακαθαρσίες αποαμίδωσης. Η καθαρότητα του καθενός ήταν πάνω από 95%, με δεδομένα MS και NMR. Ο διευθυντής του έργου είπε, "Οι ακαθαρσίες του Somalutide είναι πιο περίπλοκες από άλλα πεπτίδια, ειδικά το PEG, το οποίο αναζητούσαμε πολλές εταιρείες, αλλά όλες είπαν ότι δεν μπορούσαν να το κάνουν. Αλλά μπορέσατε να τα κάνετε όλα και τα δεδομένα ήταν πλήρη, κάτι που ήταν μεγάλη βοήθεια." Στη συνέχεια, ολοκληρώθηκε με επιτυχία η επικύρωση της μεθόδου τους και τώρα ετοιμάζονται για την κατάθεση.

Περίπτωση 2: CRO, ειδική μελέτη για ακαθαρσίες στην αλυσίδα PEG
Ανέλαβαν ένα ποιοτικό ερευνητικό έργο για τη σωματοστατίνη, το οποίο απαιτούσε μια ολοκληρωμένη ανάλυση των ακαθαρσιών που σχετίζονται με την αλυσίδα PEG. Συνθέσαμε συστηματικά τις ακαθαρσίες που σχετίζονται με το PEG: πλήρης απουσία αλυσίδας PEG, μείωση στο μισό του μήκους της αλυσίδας PEG, οξείδωση των άκρων της αλυσίδας PEG και διάσπαση της αλυσίδας PEG σε δύο μέρη. συνέθεσε συνολικά 8 ακαθαρσίες σχετικές με PEG-. Ο πελάτης χρησιμοποίησε αυτά τα στοιχεία ελέγχου για να δημιουργήσει ένα πλήρες σύνολο μεθόδων ανίχνευσης ακαθαρσιών PEG, το οποίο έγινε το αποκορύφωμα των πληροφοριών αρχειοθέτησής του.

Περίπτωση 3: Μελέτες σταθερότητας, εταιρεία βιοτεχνολογίας
Έκαναν μια μελέτη σταθερότητας του σκευάσματος σωματοστατίνης και διαπίστωσαν ότι η περιεκτικότητα ενός προϊόντος αποικοδόμησης αυξήθηκε γρήγορα υπό συνθήκες επιτάχυνσης, αλλά δεν ήξεραν τι ήταν. Αναλύσαμε το δείγμα με LC-MS, υποθέσαμε ότι ήταν ένα λιπαρό οξύ που αποβάλλει ακαθαρσίες σε μια συγκεκριμένη τοποθεσία και, στη συνέχεια, το συνθέσαμε με στοχευμένο τρόπο και το επιβεβαιώσαμε συγκριτικά. Καθιέρωσαν μια ανάλυση χρησιμοποιώντας αυτόν τον έλεγχο και παρακολούθησαν με ακρίβεια την τάση αυτού του προϊόντος αποδόμησης. Αργότερα, κατά την υποβολή της έκθεσης, αυτό το μέρος των δεδομένων τονίστηκε από τους εμπειρογνώμονες και λόγω των στέρεων δεδομένων δεν εκδόθηκε αποζημίωση.

Η σωματοστατίνη είναι ένα εξαιρετικά δημοφιλές προϊόν, αλλά η μελέτη ακαθαρσιών είναι μια λεπτή δουλειά, ειδικά οι ακαθαρσίες που σχετίζονται με την αλυσίδα PEG και τα προϊόντα απολέπισης λιπαρών οξέων, τα οποία πολλοί κατασκευαστές δεν μπορούν να χειριστούν. Εάν κάνετε ποιοτική έρευνα ή γενική ανάπτυξη σωματοστατίνης και χρειάζεστε έλεγχο ακαθαρσιών, καλώς ήρθατε να μιλήσετε μαζί μας. Έχουμε κάνει πολλή δουλειά, ξέρουμε ποιες είναι οι δυσκολίες και ξέρουμε πώς να τα βγάλουμε πέρα.