Σταθερά ισότοπα επισημασμένα πεπτίδια

Meta Περιγραφή

Need stable isotope labeled peptide for mass spectrometry quantification or internal standard? Science-Peptide provides professional stable isotope labeled peptide synthesis service, ¹³C, ¹⁵N, ²H single labeled or multi-labeled, abundance >99%, purity >95%, επικύρωση MS υψηλής ανάλυσης. Τα ερωτήματα είναι ευπρόσδεκτα.

Σταθερά πεπτίδια με σήμανση με ισότοπο: Πιο ακριβής ποσοτικοποίηση, πιο αξιόπιστα αποτελέσματα

Γιατί πεπτίδια σημασμένα με σταθερά ισότοπα;
Όποιος ασχολείται με πρωτεομική ή μεταβολομική γνωρίζει ότι το εσωτερικό πρότυπο είναι το κλειδί για την ακριβή ποσοτικοποίηση φασματομετρίας μάζας. Τα πεπτίδια με σήμανση σταθερού ισοτόπου είναι χημικά πανομοιότυπα με τα φυσικά πεπτίδια, αλλά λίγο βαρύτερα και μπορούν να διαχωριστούν με φασματομετρία μάζας, που είναι το χρυσό πρότυπο για τον απόλυτο ποσοτικό προσδιορισμό.

Πού χρησιμοποιούνται πεπτίδια με σήμανση σταθερού ισοτόπου;
Απόλυτη ποσοτικοποίηση με φασματομετρία μάζας: ως εσωτερικό πρότυπο για τη διόρθωση των επιδράσεων της μήτρας και της απόδοσης ιονισμού.
Ανάπτυξη μεθόδου SRM/MRM: καθιέρωση ποσοτικών μεθόδων, βελτιστοποίηση παραμέτρων φασματομετρίας μάζας
Ανάλυση μεταβολικής ροής: για τον εντοπισμό μεταβολικών οδών και τον υπολογισμό των ροών
Κινητική υδρόλυσης πρωτεϊνών: για τη μελέτη της αποτελεσματικότητας της ενζυματικής διάσπασης
Κλινική διάγνωση: καθιέρωση ποσοτικών μεθόδων για δείκτες ασθένειας.

Τι μπορούμε να κάνουμε

1. Τύποι ισοτόπων, ανάλογα με το τι χρειάζεστε

Ισότοπο	Θέση επισήμανσης	Μαζική αύξηση	Σενάρια
¹³C	άνθρακας κορμού αμινοξέων	Με βάση τον αριθμό των ατόμων άνθρακα	Πιο συχνά χρησιμοποιούμενη, σημαντική μετατόπιση στο φάσμα μάζας
¹⁵N	Άζωτο αμιδίου ή πλευρικής αλυσίδας	Κάθε άζωτο + 1	Διπλή-επισήμανση με ¹³C
²H (D)	Άτομα υδρογόνου	+1 ανά δευτέριο	Φτηνό, αλλά μπορεί να έχει χρωματογραφική μετατόπιση
¹⁸O	C-τελικό καρβοξυ οξυγόνο	+2	Σήμανση μετά τη διάσπαση, καλή για τρυπτικά πεπτίδια.

2. Μέθοδος επισήμανσης, εξαρτάται από το πόσα βάρη χρειάζεστε

Τύπος επισήμανσης	Περιγραφή	Πότε να χρησιμοποιείται
Ενιαία επισήμανση	Επισημαίνεται μόνο ένα ισότοπο, π.χ. ¹3C	Τακτική ποσοτικοποίηση,-ελεγχόμενο κόστος
Διπλή σήμανση	Υψηλότερη μετατόπιση μάζας, π.χ., 13C+15N	Αποφεύγει την επικάλυψη με κορυφές φυσικών ισοτόπων πεπτιδίων
Πλήρης επισήμανση	Όλα τα αμινοξέα επισημασμένα	Μελέτες μεταβολικής ροής, σπάνιες
Σημείο επισήμανσης	Τοποθέτηση-συγκεκριμένης ετικέτας, π.χ., Lys-¹³C σε μια συγκεκριμένη θέση	Ειδικές ανάγκες, απαιτείται σχεδιασμός

3. επισημασμένα πεπτίδια που μπορούμε να συνθέσουμε
Μεμονωμένα-επισημασμένα αμινοξέα: π.χ. 13C6-Arg, 13C5-διακλαδισμένης αλυσίδας αμινοξέα, 15N2-Lys, κ.λπ.
Διπλά-επισημασμένα αμινοξέα: π.χ. 13C9,15N-Tyr, 13C6,15N4-Arg
Επισήμανση δευτέριου: π.χ. d3-Ala, d10-Leu, κ.λπ.
Επισήμανση C-τερματικού 18O: επισήμανση μετά την πέψη, για τρυπτικά πεπτίδια

4. Δυνατότητα σύνθεσης

Προγράμματα	Ικανότητα
Μήκος πεπτιδίου	5-30 αμινοξέα (η επισήμανση ισοτόπων των αμινοξέων είναι δαπανηρή, κατάλληλη για μικρά πεπτίδια)
Ιστότοπος επισήμανσης	Μπορούν να καθοριστούν μεμονωμένα ή πολλαπλά επισημασμένα αμινοξέα
Αφθονία ισοτόπων	>99%
Επιλογές καθαρότητας	Regular purity (95-98%), high purity (>98%)
Απόδοση ανά λωρίδα	0,5-10 mg (ανάλογα με το μήκος του πεπτιδίου και την πολυπλοκότητα της επισήμανσης)
Μορφή παράδοσης	Σωλήνες φυγοκέντρησης, φιαλίδια
Χρόνος κύκλου	2-4 εβδομάδες (απαιτείται προσαρμοσμένη επισήμανση αμινοξέων)

5. Ποιοτικός έλεγχος: για επιβεβαίωση της σωστής επισήμανσης και καθαρότητας των πεπτιδίων
Ο ποιοτικός έλεγχος των πεπτιδίων με σταθερή σήμανση με ισότοπο εξαρτάται από δύο βασικά σημεία: εάν η επισήμανση είναι σωστή ή όχι και εάν η καθαρότητα είναι επαρκής ή όχι.
Υψηλής ανάλυσης MS: ακριβής επιβεβαίωση μέτρησης μάζας, για να δείτε εάν η επισήμανση έχει ολοκληρωθεί.
HPLC: αναζητήστε την καθαρότητα και επίσης αναζητήστε μη επισημασμένα υπολείμματα πεπτιδίου.
Ανάλυση αμινοξέων: προαιρετική, για επιβεβαίωση της αναλογίας των σημασμένων αμινοξέων.

Γιατί χρειάζεστε να κάνουμε σταθερό πεπτίδιο σήμανσης ισοτόπων;

1. Το κάνουμε αυτό εδώ και 20 χρόνια
Το σταθερό ισότοπο-επισημασμένο πεπτίδιο ακούγεται σαν "συντίθεται με βαρύτερα αμινοξέα", αλλά τα επισημασμένα αμινοξέα είναι ακριβά, ποικίλα και έχουν ειδικές συνθήκες αντίδρασης, επομένως διαφέρει από τη συνηθισμένη σύνθεση. Με τα χρόνια, βοηθήσαμε τους πελάτες μας να παράγουν διάφορα είδη επισημασμένων πεπτιδίων: από την απλούστερη μονή-επισήμανση ¹3C έως τη σύνθετη διπλή-επισήμανση ¹3C+15N και από μικρά πεπτίδια έως πεπτίδια μεσαίου-μήκους, έχουμε συσσωρευμένη εμπειρία.

2. Έχουμε μια πλήρη γκάμα επισημασμένων αμινοξέων
Επισήμανση 13C: αλανίνη, αργινίνη, ισολευκίνη, λευκίνη, λυσίνη, φαινυλαλανίνη, προλίνη, θρεονίνη, τυροσίνη, βαλίνη και ούτω καθεξής.
Επισήμανση 15N: μονή ή διπλή σήμανση 15N για διάφορα αμινοξέα
Επισήμανση δευτερίου: d3-Ala, d3-Leu, d5-Phe, d10-Leu, κ.λπ.
Διπλή επισήμανση: 13C+15N συνδυασμός με μεγαλύτερη μετατόπιση μάζας

3. Εγγυημένη αφθονία, χωρίς μισά-πεπτίδια.
What is the biggest fear of stable isotope labeled peptides? Incomplete labeling, mixing with unlabeled peptides, and then the quantification will not be accurate. We use labeled amino acids with >99% αφθονία, ελέγξτε αυστηρά τη διαδικασία σύνθεσης και τελικά επιβεβαιώστε ότι δεν υπάρχει μη επισημασμένο υπόλειμμα πεπτιδίου από MS υψηλής ανάλυσης.

4. Καθαρότητα κατά παραγγελία, όχι σπατάλη χρημάτων
Συμβατική καθαρότητα (95-98%): αρκετή για ανάπτυξη ποσοτικής μεθόδου φασματομετρίας μάζας και εσωτερικό πρότυπο.
High purity (>98%): κλινικά διαγνωστικά πρότυπα, απόλυτη ποσοτικοποίηση, πιο σταθερά αποτελέσματα.

5. Πλήρη δεδομένα, η επισήμανση μπορεί να εντοπιστεί.
Παρέχουμε-δεδομένα MS υψηλής ανάλυσης για κάθε επισημασμένο πεπτίδιο και ο ακριβής αριθμός μάζας αντιστοιχίζεται για να αποδειχθεί ότι η επισήμανση είναι σωστή.

6. Από την ανάπτυξη της μεθόδου μέχρι την κλινική δοκιμή.
Μετά την εύρεση ενός καλού επισημασμένου εσωτερικού προτύπου πεπτιδίου, υπάρχει συχνά ανάγκη για περισσότερη-επακόλουθη εργασία: όπως η ενίσχυση της σύνθεσης, η δημιουργία μιας έκδοσης GMP για κλινική διάγνωση. επιστήμη-Το πεπτίδιο μπορεί να είναι απρόσκοπτο, ο ίδιος διαχειριστής έργου πρέπει να ακολουθήσει μέχρι το τέλος, χωρίς να χρειάζεται να επαναληφθεί η επικοινωνία.

Σταθερά Πεπτίδια Επισημασμένα Ισότοπα

Περιοχή έρευνας	Τρόπος χρήσης	Συνιστώμενοι τύποι επισήμανσης
Proteomics	Απόλυτη ποσοτικοποίηση SRM/MRM	Σήμανση 13C ή 13C+15N
Μεταβολομική	Ανάλυση Μεταβολικής Ροής	Πλήρως επισημασμένο ή με ειδική σήμανση
Κλινική Διαγνωστική	Ποσοτικοποίηση δείκτη ασθενειών	Υψηλή καθαρότητα, σήμανση 13C
Φαρμακοκινητική	Ποσοτικοποίηση φαρμάκου πεπτιδίου	Σήμανση 13C ή ²H
Ενζυμική Κινητική	Ποσοτικοποίηση προϊόντων ενζυμικής διάσπασης	18 Σήμανση O (C-τερματικό)

Παράδοση και Ποιοτικός Έλεγχος

Παράδοση: λυοφιλοποιημένη σκόνη, σωλήνες φυγοκέντρησης ή φιαλίδια
Συνοδευτικά έγγραφα: COA (χάρτης καθαρότητας HPLC, φασματομετρία μάζας MS υψηλής ανάλυσης), αναφορά σύνθεσης (προαιρετικό)
Προαιρετικές δοκιμές: ανάλυση αμινοξέων, περιεκτικότητα σε πεπτίδια, ενδοτοξίνη
Προσαρμοσμένη συσκευασία: Σύμφωνα με την απαίτησή σας, την επισήμανση και τη συσκευασία

Πριν αποσταλεί κάθε πεπτίδιο με σήμανση σταθερού ισοτόπου, θα εξετάσουμε την επισήμανση, την καθαρότητα και το μοριακό βάρος για να διασφαλίσουμε πλήρη δεδομένα και αξιόπιστη ποιότητα.

Τρεις πραγματικές υποθέσεις

Περίπτωση 1: Εσωτερικό έργο σήμανσης πλατφόρμας πρωτεϊνικής.

The customer needed to establish MRM quantification methods for 10 biomarkers in plasma, and the corresponding stable isotope-labeled peptides were required as internal standards. We synthesized 10 ¹³C6-Arg-labeled peptides (each labeled with Arg at the C-terminus) with abundance >99% and purity >95%. Ο πελάτης καθιέρωσε μια ποσοτική μέθοδο χρησιμοποιώντας αυτά τα εσωτερικά πρότυπα με γραμμικό εύρος 3 τάξεων μεγέθους.

Περίπτωση 2: Ερευνητικό πρόγραμμα ΦΚ φαρμακευτικής εταιρείας

Ο πελάτης αναπτύσσει ένα θεραπευτικό πεπτίδιο και πρέπει να κάνει φαρμακοκινητική μελέτη, επομένως πρέπει να συνθέσει μια έκδοση του πεπτιδίου με ισότοπο-ως εσωτερικό πρότυπο. Συνθέσαμε 13C5,15N1-Val επισημασμένο πεπτίδιο και εισαγάγαμε ένα σημασμένο αμινοξύ στην αλληλουχία. Το MS υψηλής-ανάλυσης επιβεβαίωσε την πλήρη επισήμανση και ο πελάτης μέτρησε επιτυχώς τη συγκέντρωση του φαρμάκου στο πλάσμα με LC-MS/MS.

Περίπτωση 3: Ερευνητικό πρόγραμμα Μεταβολισμού

Για να μελετήσει τον μεταβολισμό των αμινοξέων διακλαδισμένης-αλυσίδας, ο πελάτης χρειαζόταν βραχέα πεπτίδια επισημασμένα με ¹3C6-Leu και ¹3C5-Val ως ιχνηθέτες. Συνθέσαμε τριπεπτίδια Leu-Val-Phe, τα οποία επισημάνθηκαν με 13C στη θέση Leu και Val, αντίστοιχα, και παρακολουθήσαμε με επιτυχία τις μεταβολικές ροές αυτών των πεπτιδίων σε πειράματα κυτταρικής πρόσληψης.

Ποιες είναι οι ανάγκες σας σε πεπτίδιο με σήμανση σταθερού ισοτόπου;

Είτε κάνετε ποσοτικοποίηση πρωτεομικής, φαρμακογενετικές μελέτες ή ανάλυση μεταβολικής ροής, εφόσον χρειάζεται να επισημάνετε το εσωτερικό πρότυπο πεπτιδίου, μπορείτε να μιλήσετε μαζί μας.

Τι πρέπει να μου πεις:
Πεπτιδική αλληλουχία
Ποιο αμινοξύ θέλετε να επισημάνετε (θέση και τύπος επισήμανσης)
Τύπος ισοτόπου (13C, 15N, 2H, κ.λπ.)
Πόση ποσότητα χρειάζεται (mg)
Απαιτήσεις καθαρότητας

Σας δίνουμε μια λεπτομερή προσφορά και σχόλια σκοπιμότητας εντός 24 ωρών.