Long Peptide Synthesis|Προσαρμογή πεπτιδίου μακράς αλυσίδας|Δύσκολη Πεπτιδική Σύνθεση|Πεπτίδια άνω των 50μερών|Επιστήμη-Πεπτίδιο
Meta Περιγραφή
Χρειάζεστε ένα μακρύ πεπτίδιο με περισσότερα από 50 αμινοξέα; Science-Η υπηρεσία Peptide's Long Peptide Synthesis καλύπτει 50-189 αμινοξέα, με στρατηγική τμηματικής σύνθεσης, ξεπερνώντας τα προβλήματα της υδρόφοβης συσσώρευσης και χαμηλής απόδοσης σύνθεσης, κ.λπ.. 20 χρόνια εμπειρίας και σταθερής παράδοσης. Καλώς ήρθατε να επικοινωνήσετε μαζί μας.
Μακρά πεπτίδια: Όσο μακρύτερα είναι, τόσο μεγαλύτερο πρόβλημα προκαλούν
Γιατί είναι δύσκολο να παραχθούν μακρά πεπτίδια;
Όποιος έχει κάνει σύνθεση πεπτιδίων ξέρει ότι το πρόβλημα προκύπτει όταν η πεπτιδική αλυσίδα είναι μεγάλη: μέσα σε 20 αμινοξέα, οι περισσότερες εταιρείες μπορούν να το κάνουν. Όταν πρόκειται για περισσότερα από 40 αμινοξέα, αρχίζουμε να επιλέγουμε την αλληλουχία. Με 60 ή περισσότερα αμινοξέα, ο αριθμός των εταιρειών που μπορούν να αναλάβουν μειώνεται κατά το ήμισυ. Όταν πρόκειται για περισσότερα από 100 αμινοξέα, δεν υπάρχουν πολλές εταιρείες που τολμούν να το κάνουν.
Γιατί; Επειδή η Long Peptide Synthesis αντιμετωπίζει πολλές παγίδες:
Η αποτελεσματικότητα της σύνθεσης μειώνεται: κάθε επέκταση ενός αμινοξέος, η απόδοση θα μειώνεται μία φορά. 30 πεπτίδιο αμινοξέος, κάθε βήμα απόδοσης 99%, η τελική απόδοση εξακολουθεί να είναι 74%. 60 αμινοξέα, κάθε βήμα είναι ακόμα 99%, η τελική απόδοση είναι μόνο 55%. Στην πραγματικότητα, η απόδοση πολλών βημάτων δεν μπορεί να φτάσει το 99%.
Υδρόφοβη συσσωμάτωση: Όταν υπάρχουν πολλά υδρόφοβα αμινοξέα σε ένα μακρύ πεπτίδιο, η πεπτιδική αλυσίδα αρχίζει να «συσσωρεύεται» στη ρητίνη και τα αμινοξέα πίσω από αυτήν δεν μπορούν να εισέλθουν.
Δυσκολία στον καθαρισμό: ο χρόνος κατακράτησης μακρών πεπτιδίων και ακαθαρσιών είναι πολύ κοντά μεταξύ τους για καθαρή κοπή.
Κακή διαλυτότητα: Όταν λαμβάνεται το πεπτίδιο, δεν μπορεί να διαλυθεί, επομένως το πείραμα δεν μπορεί να γίνει.
Έχουμε ξαναπάει σε αυτές τις λακκούβες και ξέρουμε πώς να τις ξεπεράσουμε.

Τι μπορούμε να κάνουμε
1. Μήκος: 50-189 Αμινοξέα
|
εύρος μήκους |
Δυσκολία |
Έχουμε κάνει καταστάσεις όπου |
|
50-80 αα |
Ανώτερη μεσαία τάξη |
Routine program with >Ποσοστό επιτυχίας 90%. |
|
80-120 αα |
Ψηλά |
Χρειάζεστε στρατηγική τμηματικής σύνθεσης, αρκετή εμπειρία |
|
120-150 αα |
Πολύ ψηλά |
Έχω κάνει πολλά από αυτά, μέχρι και 150. |
|
150-189 αα |
Εξαιρετικά ψηλά |
Επίπεδο πρόκλησης, με ιστορίες επιτυχίας |
2. Στρατηγική τμηματικής σύνθεσης
Ο πιο αποτελεσματικός τρόπος για να αντιμετωπίσετε τα μακρά πεπτίδια είναι να τα τμηματοποιήσετε:
Επιλογή τμήματος: Κόψτε το μακρύ πεπτίδιο σε 2-4 τμήματα των 30-60 αμινοξέων το καθένα. Το σημείο κοπής πρέπει να βρίσκεται στη θέση όπου η δυσκολία σύνθεσης είναι χαμηλή, για παράδειγμα, αποφεύγοντας τη συνεχή υδρόφοβη περιοχή.
Σύνθεση θραυσμάτων: Κάθε θραύσμα συντίθεται και καθαρίζεται ξεχωριστά σε επαρκώς υψηλή καθαρότητα.
Σύνδεση θραυσμάτων: ένωση θραυσμάτων σε διάλυμα ή σε ρητίνη. Η μέθοδος σύνδεσης μπορεί να είναι είτε φυσική χημική είτε ενζυματική.
Αναδίπλωση: Εάν το πεπτίδιο έχει δισουλφιδικό δεσμό, πρέπει να διπλωθεί στη σωστή διαμόρφωση μετά το μάτισμα.
3. Καθαρότητα: Ανάλογα με τις Πειραματικές Απαιτήσεις
|
Επίπεδο καθαρότητας |
Ισχύοντα σενάρια |
|
Συμβατικό καθαρό (85-95%) |
Συνδυάζοντας πειραματικό, ενεργό πρωτογενή έλεγχο |
|
Υψηλή καθαρότητα (95-98%) |
κυτταρικά πειράματα, λειτουργική επικύρωση |
|
Ultrapure (>98%) |
Δομικές μελέτες, κρυσταλλογραφία |
Κάθε μακρύ πεπτίδιο συνοδεύεται από αναφορά HPLC και MS, καθιστώντας τα δεδομένα καθαρότητας διαφανή.
4. Τροποποιήσεις: τα μακρά πεπτίδια μπορούν επίσης να προσθέσουν λειτουργία
Φθορίζουσα επισήμανση: FITC, TAMRA, θέλουν να δουν πού τρέχει το μακρύ πεπτίδιο.
Βιοτίνη: Κάντε τραβήξτε-κάτω ή δοκιμάστε.
Σήμανση ισοτόπων: για NMR ή ποσοτικοποίηση φασματομετρίας μάζας.
Φωσφορυλίωση/γλυκοζυλίωση: μίμηση μετα-μεταφραστικών τροποποιήσεων.
Γιατί να έρθετε σε εμάς για Long Peptide Synthesis;
1. Το κάνουμε αυτό εδώ και 20 χρόνια
Το Long Peptide Synthesis δεν είναι κάτι που μπορεί να κάνει ο καθένας. Με τα χρόνια, έχουμε χειριστεί πολλά μακρά πεπτίδια: θραύσματα διαμεμβρανικής πρωτεΐνης, πεπτίδια σύντηξης ιών, αμυλοειδείς πρωτεΐνες, αντιμικροβιακά πεπτίδια κ.λπ. Έχουμε μια καλή ιδέα για το ποιες αλληλουχίες είναι εύκολο να συγκεντρωθούν και ποιες συνθήκες μπορούν να τις σώσουν. Αν έρθετε σε εμάς για Long Peptide Synthesis, τουλάχιστον δεν χρειάζεται να πατήσετε το λάκκο από την αρχή.
2. Κλασματική σύνθεση: όχι απλώς κοπή σε κομμάτια
Η τμηματοποίηση ακούγεται απλή, αλλά πού να κόψετε, πόσο μήκος είναι κάθε τμήμα και πώς να τα συνδέσετε είναι όλα σημαντικά. Έχουμε πολλές αρχές:
Κόψιμο στην υδρόφιλη ζώνη: Αποφύγετε την κοπή στον υδρόφοβο πυρήνα, διαφορετικά τα τμήματα θα συγκεντρωθούν μόνα τους.
Ισορροπήστε το μήκος των τμημάτων: Μην κάνετε ένα τμήμα ιδιαίτερα δύσκολο να το κάνετε και άλλα τμήματα ιδιαίτερα εύκολα. 3.
Επιλογή σημείου σύνδεσης: Οι φυσικές χημικές συνδέσεις απαιτούν ένα θειοεστέρα στο C-τερματικό και το Cys στο τερματικό N-, το οποίο πρέπει να έχει σχεδιαστεί εκ των προτέρων.
3. Υδρόφοβα πεπτίδια: ειδικό σύστημα διαλυτών.
Μερικά μακρά πεπτίδια είναι τόσο υδρόφοβα που δεν μπορούν να λυθούν με συμβατικούς διαλύτες, επομένως θα συσσωματωθούν στη ρητίνη όταν συντεθούν. Διαθέτουμε ειδικό σύστημα διαλυτών και πρόσθετα για να διατηρηθεί η τάνυση της πεπτιδικής αλυσίδας κατά τη διάρκεια της διαδικασίας σύνθεσης, έτσι ώστε να μπορούν να εισέλθουν τα ακόλουθα αμινοξέα.
4. Ποιοτικός έλεγχος: δεδομένα σε κάθε βήμα
Ο ποιοτικός έλεγχος των μακριών πεπτιδίων είναι πιο περίπλοκος από εκείνον των βραχέων πεπτιδίων:
Ποιοτικός έλεγχος των ενδιάμεσων προϊόντων: αφού συνθέσετε κάθε θραύσμα, μετρήστε πρώτα την καθαρότητα και το μοριακό βάρος και μετά προχωρήστε στο επόμενο βήμα αφού περάσετε τη δοκιμή.
Παρακολούθηση διαδικασίας ματίσματος: Δείξτε την αντίδραση σύνδεσης και μετρήστε το MS για να δείτε την απόδοση της σύνδεσης.
Επιθεώρηση τελικού προϊόντος: HPLC για καθαρότητα, MS για μοριακό βάρος, MS/MS για ορθότητα αλληλουχίας (προαιρετικό).
Δοκιμή διαλυτότητας: Παρέχετε συνιστώμενους διαλύτες και μεθόδους διαλυτοποίησης, ώστε να μην λαμβάνετε πεπτίδια που δεν διαλύονται.
Κάνοντας Long Peptide Synthesis, τα δεδομένα μιλούν από μόνα τους και κάθε βήμα είναι ανιχνεύσιμο.
5. Από χιλιοστόγραμμα έως εκατό χιλιοστόγραμμα, μέχρι το τέλος
Χιλιοστόγραμμα για τη φάση διαλογής, δέκα χιλιοστόγραμμα για τη φάση επικύρωσης, εκατό χιλιοστόγραμμα για τη δομική μελέτη - μπορούμε να τα πάρουμε όλα. Το ίδιο έργο, το ίδιο αντίστοιχο, δεν χρειάζεται να-εναρμονιστεί εκ νέου.
Σε τι μπορούν να χρησιμοποιηθούν τα μακρά πεπτίδια;
|
Τομείς έρευνας |
Κοινές Χρήσεις |
Έχουμε κάνει καταστάσεις όπου |
|
πρωτεΐνες μεμβράνης |
διαμεμβρανικά θραύσματα, εξωκυτταρικοί βρόχοι |
Μακρύ πεπτίδιο με πολλαπλές διαμεμβρανικές περιοχές, εξαιρετικά υδρόφοβο |
|
ιικές πρωτεΐνες |
Πεπτίδια σύντηξης, τομείς δέσμευσης υποδοχέων- |
Νέο θραύσμα πρωτεΐνης κοροναϊού S, περίπου 100aa |
|
Αμυλοειδές |
A , -συνουκλεΐνη |
42αα είναι ο κανόνας. Έχουν γίνει μεγαλύτερα |
|
Αντιμικροβιακά πεπτίδια |
Μακράς-αλυσίδας αντιμικροβιακά πεπτίδια |
Ορισμένα φυσικά αντιμικροβιακά πεπτίδια είναι μόλις 40-60aa |
|
Κυτοκίνες |
προσομοίωση της ενεργής ζώνης |
50-80aa, με δισουλφιδικούς δεσμούς |
|
δομική βιολογία |
NMR, κρυσταλλογραφία |
Isotopically labeled peptide, purity >98%. |
Παράδοση και έλεγχος ποιότητας
- Παράδοση: Λυοφιλοποιημένη σκόνη, σωλήνες φυγοκέντρησης ή φιαλίδια, προστατευμένα από άζωτο.
- Συνοδευτικά έγγραφα: COA (προφίλ HPLC + προφίλ MS), MS/MS (επιβεβαίωση ακολουθίας προαιρετική), αναφορά σύνθεσης (διαδικασία τμηματοποίησης και ματίσματος).
- Προαιρετικές δοκιμές: περιεκτικότητα σε πεπτίδια, ενδοτοξίνη, υγρασία, σύνθεση αμινοξέων, δοκιμή διαλυτότητας.
- Προσαρμοσμένη συσκευασία: μερίδα και σήμανση σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας.
- Κάθε προϊόν Long Peptide Synthesis ελέγχεται δύο-για να διασφαλιστεί ότι η αλληλουχία είναι σωστή και ότι η καθαρότητα είναι στα πρότυπα πριν αποσταλεί.



Τρεις πραγματικές-υποθέσεις
Περίπτωση 1: Πρόγραμμα πρωτεΐνης μεμβράνης σε ερευνητικό ινστιτούτο
The customer needs a 85aa transmembrane peptide for structural study. This peptide has 60% of hydrophobic amino acids, so many companies could not make it. We used segmental synthesis, cut into three segments, each segment is about 30aa, purified and then liquid-phase ligated. The final purity of the peptide is >95% και ο πελάτης το πήρε και έκανε NMR.
Περίπτωση 2: Πρόγραμμα ιογενών πρωτεϊνών πολυεθνικής φαρμακευτικής εταιρείας
A 110aa viral fusion peptide with two pairs of disulfide bonds was required for inhibitor screening. We designed a segmented synthesis strategy to synthesize three linear fragments first, which were joined and then oxidized to form disulfide bonds. The final product was delivered with >90% καθαρότητα, σωστά ζεύγη δισουλφιδικών δεσμών και πέρασε την επαλήθευση δραστηριότητας.
Περίπτωση 3: Έρευνα αμυλοειδούς σε εθνικό πανεπιστήμιο
The customer needs a 70aa fragment of alpha-synuclein for the study of aggregation mechanism. This peptide is easy to form fibers and always blocked the column during purification. We optimized the mobile phase conditions, added a small amount of organic solvent, and finally obtained a product with purity >95% και ο πελάτης πραγματοποίησε με επιτυχία πειράματα ThT.
Μιλάτε για τις μακροχρόνιες ανάγκες σας σε πεπτίδια;
Είτε θέλετε ένα διαμεμβρανικό πεπτίδιο 80aa είτε μια ιική πρωτεΐνη 150aa, μπορείτε να μιλήσετε μαζί μας. Εάν ζητήσετε από το Science-Peptide να κάνει Long Peptide Synthesis, τουλάχιστον δεν χρειάζεται να δοκιμάσετε ένα προς ένα.
Θέλω να μου πεις:
Πεπτιδική αλληλουχία (ή πληροφορίες στόχου)
Πόσο (χιλιοστόγραμμα)
απαιτήσεις καθαρότητας
δεν έχουν δισουλφιδικούς δεσμούς ή άλλες τροποποιήσεις
Πότε το θέλεις;
Σας δίνουμε μια αξιολόγηση σκοπιμότητας και προσφορά εντός 24 ωρών.