Σύνθεση Γλυκοπεπτιδίου|Γλυκοζυλιωμένα Πεπτίδια|O-Συνδεδεμένα γλυκοπεπτίδια|N-Συνδεδεμένα γλυκοπεπτίδια|Επιστήμη-Πεπτίδιο
Meta Περιγραφή
Χρειάζεστε γλυκοπεπτίδια για έρευνα γλυκοβιολογίας ή μίμηση γλυκοπρωτεϊνών; Η υπηρεσία Science-PeptideGlycopeptide Synthesis καλύπτει τη σύνδεση Ο-σύνδεσης, Ν-και την εισαγωγή σύνθετων γλυκανών. 20 χρόνια εμπειρίας, ακριβής έλεγχος των θέσεων γλυκοζυλίωσης. Μη διστάσετε να επικοινωνήσετε μαζί μας.
Γλυκοπεπτίδια: προσομοίωση γλυκοζυλίωσης του πραγματικού-κόσμου
Γιατί κάνετε γλυκοπεπτίδια;
Οι πρωτεΐνες σπάνια είναι "γυμνές" στο σώμα - οι περισσότερες μεταφέρουν σάκχαρα. Η γλυκοζυλίωση επηρεάζει την αναδίπλωση των πρωτεϊνών, τη σταθερότητα, την αναγνώριση και τη σηματοδότηση. Εάν θέλετε να μελετήσετε τη λειτουργία μιας γλυκοπρωτεΐνης ή να αναπτύξετε ένα αντίσωμα ενάντια σε έναν επίτοπο γλυκάνης, δεν αρκεί να έχετε ένα γυμνό πεπτίδιο, πρέπει να συνδέσετε τις γλυκάνες.
Η δυσκολία της Σύνθεσης Γλυκοπεπτιδίου έγκειται στη σύνθετη δομή της ίδιας της αλυσίδας γλυκάνης και στην ανάγκη διασφάλισης της σωστής θέσης και της ακεραιότητας της αλυσίδας γλυκάνης όταν συνδέεται με το πεπτίδιο. Η σύζευξη Ο-είναι καλή, αλλά οι Ν-συζευγμένες αλυσίδες γλυκάνης είναι πολύ μεγαλύτερες, γεγονός που κάνει τη δυσκολία σύνθεσης να διπλασιάζεται απευθείας. Έχουμε μπει σε αυτές τις λακκούβες στο παρελθόν και ξέρουμε πώς να τις ξεπεράσουμε.

Τι μπορούμε να κάνουμε
1. Τύπος γλυκοζυλίωσης: Δημιουργούνται δεσμοί και O- και N-
|
Τύπος |
Μέθοδος σύνδεσης |
Κοινά γλυκοσυζεύγματα |
Έχουμε κάνει καταστάσεις όπου |
|
Ο-συνδεδεμένα γλυκοπεπτίδια |
Ζάχαρη-συνδεδεμένη με την ομάδα υδροξυλίου από την πλευρά Ser/Thr- |
GalNAc,GlcNAc,Gal,Man |
Έχω κάνει μονοσακχαρίτες σε πεντασακχαρίτες και έχω σταθερή απόδοση |
|
N-συνδεδεμένα γλυκοπεπτίδια |
Ζάχαρη-συνδεδεμένη με την πλευρική-αλυσίδα αμιδίου του Asn |
GlcNAc, τύπου υψηλής μαννόζης, σύνθετου τύπου |
Το μεγαλύτερο που έχω κάνει είναι εννέα σάκχαρα, κάτι που απαιτεί ειδικές στρατηγικές προστασίας |
|
Οξίνιση του σάλιου |
με σιαλικό οξύ στο τέλος |
μιμούνται φυσικές θέσεις αναγνώρισης γλυκοπρωτεϊνών |
Το σιαλικό οξύ πέφτει εύκολα. Βελτιστοποιήσαμε τις συνθήκες |
Ανάλογα με τους ερευνητικούς σας στόχους, θα προωθήσουμε ποια στρατηγική γλυκοζυλίωσης είναι η καταλληλότερη. Το πρώτο βήμα στη σύνθεση γλυκοπεπτιδίων είναι να επιλέξετε τη σωστή αλυσίδα και δεσμό σακχάρου.
2. Μήκος αλυσίδας ζάχαρης: από μονοσακχαρίτες έως σύνθετες αλυσίδες ζάχαρης
Τροποποίηση μονοσακχαρίτη: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal, κ.λπ., απλούστερη και πιο επιτυχημένη.
Δισακχαρίτες/τρισακχαρίτες: π.χ. λακτόζη, χιτοζάνη, πρέπει να προστατεύονται καλά από δότες γλυκοζυλίου.
Σύνθετες αλυσίδες σακχάρου: τύπος υψηλής μαννόζης, σύνθετες Ν-γλυκάνες, έως εννέα σάκχαρα.
Σιαλυλίωση: Η τερματική σύνδεση με το σιαλικό οξύ μιμείται τη θέση αναγνώρισης των φυσικών γλυκοπρωτεϊνών.
3. Έλεγχος σημείων: ακρίβεια, χωρίς εικασίες
Ποιος είναι ο μεγαλύτερος φόβος της γλυκοζυλίωσης; Γλυκοσύζευξη σε λάθος τοποθεσία, ή μια τοποθεσία είναι συνδεδεμένη αλλά η άλλη δεν είναι. Με την ορθογώνια στρατηγική μας προστασίας, μπορούμε να εισαγάγουμε γλυκοζυλίωση σε μια συγκεκριμένη θέση και να αφήσουμε τις άλλες θέσεις ανέπαφες. Χρειάζεστε γλυκοσυλίωση πολλαπλών θέσεων; Μπορούμε να τα εισάγουμε ένα προς ένα και να τα ελέγχουμε ξεκάθαρα.
4. Καθαρότητα: Ανάλογα με τις Πειραματικές Απαιτήσεις
|
Επίπεδο καθαρότητας |
Ισχύοντα σενάρια |
|
Συμβατικό καθαρό (85-95%) |
Συνδυάζοντας πειραματικό, ενεργό πρωτογενή έλεγχο |
|
Υψηλή καθαρότητα (95-98%) |
κυτταρικά πειράματα, λειτουργική επικύρωση |
|
Ultrapure (>98%) |
δομικές μελέτες, NMR, κρυσταλλογραφία |
Κάθε γλυκοπεπτίδιο συνοδεύεται από αναφορές HPLC και MS, με δεδομένα που υποστηρίζουν την ακεραιότητα της αλυσίδας γλυκάνης και τη σωστή θέση.
5. Άλλες τροποποιήσεις στα γλυκοπεπτίδια
Τα γλυκοπεπτίδια είναι αρκετά πολύπλοκα από μόνα τους, αλλά ορισμένα πειράματα απαιτούν κάτι άλλο:
Φθορίζουσα επισήμανση: FITC, TAMRA, προορισμός γλυκοπεπτιδίου παρακολούθησης.
Βιοτίνη: Κάντε τραβήξτε-κάτω ή δοκιμάστε.
Φωσφορυλίωση: Ταυτόχρονη προσομοίωση γλυκοζυλίωσης και φωσφορυλίωσης για τη μελέτη της αλληλεπίδρασης.
Σήμανση ισοτόπων: για NMR ή ποσοτικοποίηση φασματομετρίας μάζας.
Γιατί να επιλέξετε την υπηρεσία σύνθεσης γλυκοπεπτιδίων;
1. Γλυκοχημεία + σύνθεση πεπτιδίων, δύο-προσέγγιση
Η σύνθεση γλυκοπεπτιδίου είναι δύσκολη επειδή διασχίζει δύο πεδία - τη γλυκοχημεία και τη σύνθεση πεπτιδίων. Αυτοί που παράγουν ζάχαρη μπορεί να μην γνωρίζουν το πεπτίδιο και εκείνοι που παράγουν πεπτίδια μπορεί να μην γνωρίζουν τη ζάχαρη. Έχουμε ανθρώπους και στις δύο πλευρές, προετοιμάζουμε μόνοι μας τον δότη γλυκοζυλίου, βελτιστοποιούμε μόνοι μας τις συνθήκες γλυκοζυλίωσης, δεν χρειάζεται να αναθέτουμε σε εξωτερικούς συνεργάτες και μπορούμε να προσαρμόσουμε μόνοι μας τα προβλήματα.
2. Ευέλικτες στρατηγικές προστασίας και ακεραιότητα της αλυσίδας ζάχαρης
Κατά τη διάρκεια της γλυκοζυλίωσης, η ίδια η αλυσίδα σακχάρου πρέπει να προστατεύεται, διαφορετικά οι συνθήκες της αντίδρασης θα αποκλείσουν τη ζάχαρη. Έχουμε διάφορους συνδυασμούς προστατευτικών ομάδων που μπορούν να σταθεροποιήσουν την αλυσίδα ζάχαρης κάτω από συνθήκες πεπτιδικής σύνθεσης και στη συνέχεια να αφήσουν το σάκχαρο ανέπαφο όταν αποπροστατευτεί στο τελικό στάδιο.
3. Έλεγχος τοποθεσίας: συνδεθείτε όπου θέλετε
Γλυκοζυλίωση Single Site: Η ζάχαρη εισάγεται σε μια καθορισμένη τοποθεσία και αφήνεται γυμνή αλλού.
Πολυ-γλυκοζυλίωση τοποθεσιών: διαφορετικές τοποθεσίες μπορούν να φέρουν διαφορετικές αλυσίδες σακχάρου, οι οποίες μπορούν να εισαχθούν μία προς μία χωρίς να παρεμβαίνουν μεταξύ τους.
Επιλεκτική γλυκοζυλίωση: υπάρχουν πολλαπλά Ser/Thr, μόνο ένα από αυτά είναι γλυκοζυλιωμένο - που επιτυγχάνεται με στρατηγική διατήρησης και όχι με πιθανότητα.
4. QC: Είναι άθικτη η αλυσίδα ζάχαρης; Είναι σωστά τα site;
Τα γλυκοπεπτίδια είναι πιο ενοχλητικά για τον ποιοτικό έλεγχο από τα κανονικά πεπτίδια:
Μοριακό βάρος MS: μπορείτε να καταλάβετε εάν το σάκχαρο είναι προσκολλημένο ή όχι κοιτάζοντάς το.
MS/MS για να δείτε το σημείο (προαιρετικό): διασπάστε το πεπτίδιο για να δείτε σε ποιο αμινοξύ είναι συνδεδεμένο το σάκχαρο.
HPLC για να δείτε την καθαρότητα: Ψάξτε επίσης για ακαθαρσίες αποσακχάρωσης.
Ανάλυση σύστασης σακχάρου: Μέτρηση της σύστασης και των δεσμών της αλυσίδας ζάχαρης όταν χρειάζεται.
Τα δεδομένα για κάθε γλυκοπεπτίδιο δίνονται σε εσάς, επομένως δεν χρειάζεται να μαντεύετε.
5. Από χιλιοστόγραμμα έως εκατό χιλιοστόγραμμα, μέχρι το τέλος
Χιλιοστόγραμμα για τη φάση διαλογής, δέκα χιλιοστόγραμμα για τη φάση επικύρωσης, εκατό χιλιοστόγραμμα για τη δομική μελέτη - μπορούμε να τα πάρουμε όλα. Το ίδιο έργο, το ίδιο αντίστοιχο, δεν χρειάζεται να-εναρμονιστεί εκ νέου.
Σε τι μπορούν να χρησιμοποιηθούν τα γλυκοπεπτίδια;
|
Τομείς έρευνας |
Κοινές Χρήσεις |
Τύπος γλυκοζυλίωσης |
|
Γλυκοβιολογία |
Μελετώντας πώς οι πρωτεΐνες που δεσμεύουν τη ζάχαρη-αναγνωρίζουν τη ζάχαρη |
O-σύνδεση, N-σύνδεση |
|
Ανάπτυξη αντισωμάτων |
διαλογή αντισωμάτων έναντι επιτόπων γλυκάνης |
σύνθετες αλυσίδες σακχάρου, οξίνιση του σάλιου |
|
Ανάπτυξη εμβολίου |
αντιγόνα των-συζευγμένων εμβολίων ζάχαρης |
επαναλαμβανόμενες μονάδες σακχάρου, σύζευξη γλυκοπεπτιδίου |
|
ιογενείς λοιμώξεις |
μιμούνται τις γλυκοπρωτεΐνες της επιφάνειας του ιού |
N-συνδεδεμένος τύπος υψηλής μαννόζης |
|
Ογκικοί δείκτες |
ασυνήθιστα γλυκοζυλιωμένα πεπτίδια |
σάκχαρα κοντής-αλυσίδας Ο- |
|
μονοπάτια σηματοδότησης |
μηχανισμούς με τους οποίους η γλυκοζυλίωση επηρεάζει τη λειτουργία |
Τροποποίηση μονοσακχαρίτη |
|
δομική βιολογία |
NMR ή κρυσταλλικές δομές γλυκοπρωτεϊνών |
ομοιογενείς αλυσίδες ζάχαρης, ισοτοπική επισήμανση |
Δομική βιολογία NMR/κρυσταλλική δομή ομογενών αλυσίδων σακχάρου γλυκοπρωτεΐνης, ισοτοπική επισήμανση
Παράδοση και έλεγχος ποιότητας
- Παράδοση: Λυοφιλοποιημένη σκόνη, σωλήνες φυγοκέντρησης ή φιαλίδια, προστατευμένα με άζωτο.
- Συνοδευτικά έγγραφα: COA (προφίλ HPLC + προφίλ MS), MS/MS (επιβεβαίωση θέσεων γλυκοζυλίωσης).
- Προαιρετικές δοκιμές: περιεκτικότητα σε πεπτίδια, ενδοτοξίνη, υγρασία, ανάλυση σύνθεσης σακχάρου.
- Προσαρμοσμένη συσκευασία: μερίδα και σήμανση σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας.
- Κάθε προϊόν Glycopeptide Synthesis ελέγχεται δύο-προτού αποσταλεί για να διασφαλιστεί ότι η αλυσίδα ζάχαρης είναι πλήρης και ότι οι τοποθεσίες είναι σωστές.



Τρεις πραγματικές-υποθέσεις
Περίπτωση Ι: Ινστιτούτο Γλυκοβιολογίας
Ο πελάτης χρειάζεται ένα Ο-συνδεδεμένο γλυκοπεπτίδιο, το οποίο είναι προσαρτημένο στο GalNAc σε μια συγκεκριμένη τοποθεσία, για τη μελέτη της αναγνώρισης λεκτίνης. Χρησιμοποιήσαμε-σύνθεση στερεάς φάσης+γλυκοζυλίωση και τροποποίηση και τελικά το MS/MS επιβεβαίωσε ότι το γλυκοπεπτίδιο ήταν συνδεδεμένο με τον καθορισμένο Ser. Ο πελάτης χρησιμοποίησε αυτό το γλυκοπεπτίδιο για SPR και πήρε τη σταθερά δέσμευσης.
Περίπτωση 2: Προγράμματα εμβολίων πολυεθνικών φαρμακευτικών εταιρειών
The customer needed a batch of N-linked glycopeptide with high mannose-type sugar chain for anti-HIV vaccine research. We prepared the glycosyl donor by ourselves, optimized the glycosylation conditions, and delivered the final batch of N-linked glycopeptides with intact glycan chains and purity >95%, έτσι τα επόμενα πειράματα εμβολιασμού του πελάτη πήγαν ομαλά.
Περίπτωση 3: Έρευνα για δείκτες όγκου σε εθνικό πανεπιστήμιο
Ο πελάτης χρειαζόταν ένα γλυκοπεπτίδιο που περιέχει σιαλυλιωμένο αντιγόνο Τ-για να μιμηθεί την ανώμαλη γλυκοζυλίωση στην επιφάνεια των καρκινικών κυττάρων. Εισαγάγαμε σιαλυλιωμένο GalNAc και εξασφαλίσαμε ότι το σιαλικό οξύ δεν χάθηκε κατά τη διαδικασία σύνθεσης. Ο πελάτης χρησιμοποίησε αυτό το γλυκοπεπτίδιο για τον έλεγχο για συγκεκριμένα αντισώματα.
Τώρα, τι γίνεται με τις ανάγκες σας σε γλυκοπεπτίδιο;
Είτε θέλετε απλά γλυκοπεπτίδια τροποποιημένα με μονοσακχαρίτες είτε σύνθετες N-συνδεδεμένες γλυκάνες, μπορούμε να μιλήσουμε. Τουλάχιστον δεν χρειάζεται να αναζητήσετε κάποιον και στις δύο πλευρές όταν ζητάτε από το Science-Peptide να κάνει τη σύνθεση γλυκοπεπτιδίων.
Θέλω να μου πεις:
πεπτιδικές αλληλουχίες
Θέσεις γλυκοζυλίωσης και δομές αλυσίδων ζάχαρης (οι αναφορές είναι καλύτερες)
Πόσο (χιλιοστόγραμμα)
απαιτήσεις καθαρότητας
Πότε το θέλεις;
Σας δίνουμε μια αξιολόγηση σκοπιμότητας και προσφορά εντός 24 ωρών.