Πεπτίδια επισημασμένα με φθορισμό|Πεπτίδια επισημασμένα με χρωστική-|FITC-επισημασμένα πεπτίδια|Cy5-επισημασμένα πεπτίδια|Πεπτίδια επισημασμένα με βιοτίνη- Science-Peptide
Meta Περιγραφή
Χρειάζεστε πεπτίδια φθορισμού ή επισημασμένα με βαφή-για απεικόνιση κυττάρων ή κυτταρομετρία ροής; Επιστήμη-Το πεπτίδιο παρέχει υπηρεσία σύνθεσης πεπτιδίων με φθορισμό και χρωστική-επισήμανση, FITC, FAM, TAMRA, Cy3/Cy5, βιοτίνη, ροδαμίνη και άλλες βαφές είναι διαθέσιμες για επιλογή, επισήμανση σταθερού σημείου, υψηλή καθαρότητα και αυστηρός έλεγχος ποιότητας. Καλώς ήρθατε να επικοινωνήσετε μαζί μας.
Φθορίζοντα και επισημασμένα με χρωστικές-πεπτίδια: το να βλέπεις είναι να πιστεύεις
Γιατί επισημασμένα πεπτίδια;
Όποιος κάνει βιολογική έρευνα καταλαβαίνει ότι συχνά δεν αρκεί να έχεις ένα πεπτίδιο, αλλά πρέπει να μπορείς να το "δείς" - για να δεις σε ποιο κύτταρο έχει εισέλθει, σε ποιες πρωτεΐνες έχει δεσμευτεί και πού έχει πάει αφού ταξιδέψει στο σώμα.
Τα πεπτίδια που φέρουν φθορισμό και χρωστικές-το κάνουν ακριβώς αυτό. Με την προσάρτηση μιας φθορίζουσας ομάδας ή χρωστικής σε ένα πεπτίδιο, το πεπτίδιο έχει «μάτια» και μπορεί να παρακολουθηθεί όπου κι αν πάει.
Ποια πειράματα δεν μπορούν να γίνουν χωρίς αυτό;
Κυτταρική απεικόνιση: για να δείτε εάν το πεπτίδιο έχει εισέλθει στο κύτταρο και πού μένει
Κυτταρομετρία ροής: ανάλυση της αναλογίας των θετικών κυττάρων που δεσμεύουν τα πεπτίδια-
Πόλωση φθορισμού: μια μελέτη της συγγένειας δέσμευσης του πεπτιδίου-υποδοχέα
Εντοπισμός ιστού: εξέταση της κατανομής των πεπτιδίων στα ζώα
Το πείραμα FRET: μελέτη πρωτεϊνικών-αλληλεπιδράσεων πρωτεϊνών

Τι μπορούμε να κάνουμε
1. Τύπος φθορίζουσας βαφής, ανάλογα με το τι χρειάζεστε
|
Τύπος βαφής |
Μήκη κύματος διέγερσης/εκπομπής |
Κοινές εφαρμογές |
|
FITC |
495nm / 525nm |
Ροή, μικροσκόπιο φθορισμού,-οικονομικό |
|
FAM |
495nm / 520nm |
Παρόμοια με το FITC, που χρησιμοποιείται συνήθως για την επισήμανση DNA/πεπτιδίου |
|
ΤΑΜΡΑ |
555nm / 580nm |
Υποδοχέας FRET, ομοεστιακή απεικόνιση |
|
Cy3 |
550nm / 570nm |
Σταθερή, υψηλή φωτεινότητα, που χρησιμοποιείται συνήθως για απεικόνιση ιστού |
|
Cy5 |
650nm / 670nm |
Μακριά-κόκκινο φόντο με χαμηλό ιστό, κατάλληλο για in vivo απεικόνιση |
|
Ροδαμίνη Β |
540nm / 625nm |
Μιτοχονδριακή σήμανση, φωτοσταθερή |
|
Κόκκινο Ροδαμίνης |
570nm / 590nm |
Κυτταρική απεικόνιση, ανθεκτική στη φωτολεύκανση |
|
Βιοτίνη |
Μη-φωτεινό, με βάση τη συγγένεια- |
ELISA, pull-κάτω, ιστοχημεία |
Έχετε άλλες ανάγκες βαφής; Σειρά Alexa Fluor, Texas Red, Pacific Blue, πείτε το, μπορούμε να το κάνουμε.
2. Σημειώστε την τοποθεσία, δείτε πού είστε συνδεδεμένοι
|
Τοποθεσίες σήμανσης |
Πώς να συνδεθείτε |
Πότε να το χρησιμοποιήσετε |
|
N-τερματικό |
Αντίδραση εστέρων χρωστικής-NHS με αμινο |
Χρησιμοποιείται πιο συχνά, προτιμάται όταν το N-τερματικό είναι μοναδικό |
|
Πλαϊνή αλυσίδα Lys |
Αντίδραση εστέρων χρωστικών-NHS με ε-αμινοξέα |
Εάν υπάρχουν περισσότερα από ένα Lys, μπορεί να επισημανθεί τυχαία |
|
Πλαϊνή αλυσίδα Cys |
Αντίδραση βαφής-μαλεϊμιδίου με σουλφυδρυλικές ομάδες |
Εξαιρετικά συγκεκριμένο, χρησιμοποιείται όταν υπάρχει δωρεάν Cys |
|
Γ-σουίτα |
Απαιτείται ειδικός σχεδιασμός |
χρησιμοποιείται όταν το τερματικό N- διατηρείται ανέπαφο |
|
Εσωτερικός ειδικός εντοπιστής |
στρατηγικές ορθογώνιας προστασίας |
Πρέπει να σχεδιαστεί για να χτυπήσει εκεί που είναι γραφτό να χτυπήσει |
3. επισημασμένα πεπτίδια που μπορούμε να συνθέσουμε
Ενιαίος δείκτης: Μόνο μία βαφή είναι προσαρτημένη, η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη
Διπλή επισήμανση: δύο διαφορετικές βαφές, κάντε FRET
Βαφές + άλλες τροποποιήσεις: π.χ. με φωσφορυλιωμένη ή βιοτίνη
Μαρκαδόροι σβέσης: π.χ. ζεύγη EDANS/DABCYL FRET
4. Συνθετικές Δυνατότητες
|
Σχέδιο |
Ικανότητα |
|
μήκος πεπτιδίου |
5-80 αμινοξέα |
|
Τύπος βαφής |
FITC, FAM, TAMRA, Cy3, Cy5, ροδαμίνη, βιοτίνη και άλλα |
|
Τοποθεσίες σήμανσης |
N-τερματικό, Cys, Lys, εσωτερικό σταθερό σημείο |
|
Η επιλογή καθαρότητας |
Συμβατικό (85-95%), υψηλής καθαρότητας (95-98%) |
|
Έξοδος μονής-λωρίδας |
1-20 mg (ανάλογα με το μήκος του πεπτιδίου και τη βαφή) |
|
μορφή παράδοσης |
Σωλήνες φυγοκέντρησης, σύριγγες (μακριά από το φως) |
|
Περιοδικότης |
3-4 εβδομάδες (ανάλογα με την πολυπλοκότητα της σήμανσης) |
5. QC: Επιβεβαίωση ότι η βαφή είναι προσαρτημένη
Ο ποιοτικός έλεγχος των πεπτιδίων φθορισμού και σημασμένων με βαφή-εξαρτάται από το εάν η βαφή έχει συνδεθεί με επιτυχία και εάν η καθαρότητα ανταποκρίνεται στα πρότυπα.
Φασματομετρία μάζας MS: για να δούμε αν το μοριακό βάρος αυξάνει τη μάζα της χρωστικής
HPLC: για να δείτε την καθαρότητα και επίσης για να δείτε εάν υπάρχει ελεύθερο υπόλειμμα βαφής
Γιατί να μας καλέσετε για πεπτίδια με σήμανση φθορισμού;
1. Το κάνουμε αυτό εδώ και 20 χρόνια
Τα πεπτίδια που φέρουν φθορισμό-μπορεί να ακούγονται σαν "βαφή", αλλά εξακολουθούν να υπάρχουν πολλά κόλπα για να επιτύχετε ακριβή τοποθεσία, πλήρη σήμανση και χωρίς σβήσιμο του φθορισμού. Με τα χρόνια, βοηθήσαμε τους πελάτες μας να επισημαίνουν πεπτίδια διαφόρων ειδών: από την απλούστερη επισήμανση FITC έως τους σύνθετους διερευνητές FRET με διπλή-σήμανση, από μικρά πεπτίδια έως μεγάλα πεπτίδια, έχουμε συσσωρευμένη εμπειρία.
2. Έλεγχος τοποθεσίας δείκτη, όπου και αν πείτε
Ορισμένες εταιρείες κάνουν μόνο ετικέτες N-τερματικών, επομένως δεν μπορείτε να καταλάβετε εάν αλλάζετε τοποθεσίες. Είμαστε διαφορετικοί:
N-επισήμανση τερματικού: λειτουργία ρουτίνας, με εστέρα NHS, καλή επιλεκτικότητα
Επισήμανση κηλίδων Cys: χρησιμοποιήστε μαλεϊμίδιο, υψηλής ειδικότητας, κατάλληλο για πεπτίδια με ελεύθερο Cys
Σήμανση Lys: μπορεί να ελεγχθεί, εάν υπάρχει μόνο ένα Lys, είναι ένα σταθερό σημείο. Εάν υπάρχουν περισσότερα από ένα, μπορεί να σχεδιαστεί στρατηγική προστασίας
Εσωτερική σταθερή-σήμανση σημείου: ορθογώνια προστασία, σημείο και λήψη
3. Ένα ευρύ φάσμα βαφών, τόσο κοινές όσο και ασυνήθιστες
Κοινές βαφές: FITC, FAM, TAMRA, Cy3, Cy5, ροδαμίνη, βιοτίνη
Ειδικές βαφές: Η σειρά Alexa Fluor, Texas Red, Pacific Blue, κ.λπ., μπορούν να προσαρμοστούν
Ζεύγη FRET: EDANS/DABCYL, Cy3/Cy5, κ.λπ
4. Καθαρότητα κατά παραγγελία, χωρίς σπατάλη χρημάτων
Καθαρό ρουτίνας (85-95%): επαρκής για κυτταρική απεικόνιση, ροή
Υψηλή καθαρότητα (95-98%): ποσοτικά πειράματα, μελέτες FRET, πιο σταθερά αποτελέσματα
5. Τα δεδομένα είναι πλήρη και επισημαίνονται με σαφήνεια
Παρέχουμε δεδομένα MS και HPLC για κάθε επισημασμένο πεπτίδιο για να σας πούμε εάν η βαφή είναι συνδεδεμένη ή όχι και πόσο καθαρή είναι.
6. Από τον έλεγχο στην εφαρμογή, μέχρι το τέλος
Μετά την εύρεση ενός επισημασμένου πεπτιδίου, υπάρχει συχνά ανάγκη για περισσότερη-επακόλουθη εργασία: για παράδειγμα, ενίσχυση για απεικόνιση ζώων, ανάπτυξη κιτ αντιδραστηρίων κ.λπ. Η επιστήμη-Το πεπτίδιο μπορεί να ενσωματωθεί απρόσκοπτα, με τον ίδιο διαχειριστή έργου να παρακολουθεί το έργο μέχρι το τέλος, χωρίς την ανάγκη επαναλαμβανόμενης επικοινωνίας.
Όπου χρησιμοποιούνται πεπτίδια με σήμανση φθορισμού
|
Τομείς έρευνας |
Πώς λειτουργεί |
Συνιστώμενες Βαφές |
|
κυτταρική απεικόνιση |
Ανάλογα σε ποιο κύτταρο εισέρχεται το πεπτίδιο και πού μένει |
FITC,TAMRA,Cy3 |
|
Κυτταρομετρία ροής |
ανάλυση σε συνδυασμό με την αναλογία των θετικών κυττάρων που |
FITC,Cy5 |
|
οργανωτική τοποθέτηση |
εξετάζοντας την κατανομή των πεπτιδίων στα ζώα |
Cy5 (φόντο χαμηλού ιστού) |
|
Μελέτη FRET |
μελέτη των πρωτεϊνικών αλληλεπιδράσεων ή διαμορφωτικών αλλαγών |
EDANS/DABCYL,Cy3/Cy5 |
|
δέσμευση υποδοχέα |
Μέτρηση σε συνδυασμό με συγγένεια |
FITC, FAM |
|
ELISA |
σύλληψη ή ανίχνευση |
Βιοτίνη |
|
in vivo απεικόνιση |
ζωντανή απεικόνιση μικρού ζώου |
Κυ5, Κυ7 |
Παράδοση και έλεγχος ποιότητας
- Παράδοση: Λυοφιλοποιημένη σκόνη, σωλήνες φυγοκέντρησης ή φιαλίδια (προστατευμένα από το φως)
- Συνοδευτικά έγγραφα: COA (γραφική παράσταση καθαρότητας HPLC, φάσματα μάζας MS), αναφορά σύνθεσης (προαιρετικό)
- Προαιρετικές δοκιμές: περιεκτικότητα σε πεπτίδια, ενδοτοξίνη
- Προσαρμοσμένη συσκευασία: Διαχωρίστε και βάλτε ετικέτα σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας
Προτού αποσταλεί κάθε πεπτίδιο με ετικέτα φθορισμού και χρωστικής-, εξετάζουμε την επισήμανση, την καθαρότητα και το μοριακό βάρος για να διασφαλίσουμε πλήρη δεδομένα και αξιόπιστη ποιότητα.



Τρεις πραγματικές-υποθέσεις
Περίπτωση 1: Το πρόγραμμα πεπτιδίων διείσδυσης κυττάρων- ενός ερευνητικού ινστιτούτου
The customer was studying a 15 amino acid periplasmic peptide and wanted to see what cells it entered. We synthesized a FITC-labeled periplasmic peptide (N-terminal labeling) with a purity of >95% και επιβεβαιωμένη επιτυχής επισήμανση από την MS. Χρησιμοποιώντας τη ροή και τη συνεστιακή μικροσκοπία, ο πελάτης μπόρεσε να δει καθαρά ότι το πεπτίδιο είχε διεισδύσει σε μια ποικιλία κυττάρων όγκου και η αποτελεσματικότητα διείσδυσης στη μεμβράνη- ήταν εμφανής.
Περίπτωση 2: FRET Probe Program, Biotech, Inc
Ο πελάτης χρειαζόταν ένα διπλό-σημασμένο πεπτίδιο για τον εντοπισμό της δραστηριότητας πρωτεάσης: EDANS στο ένα άκρο και DABCYL στο άλλο άκρο, συνθέσαμε με ακρίβεια το Cys-Πεπτίδιο-Lys και συνδέσαμε το EDANS στο Cys (μέθοδος μηλεϊμιδίου) και το DABCYL στη μέθοδο Lys (NHS ester). Η δοκιμή του πελάτη έδειξε ότι η ανάκτηση φθορισμού μετά την πέψη ήταν προφανής και η απόδοση του ανιχνευτή ήταν ικανοποιητική.
Περίπτωση 3: Ανάπτυξη ELISA για εταιρεία διαγνωστικών αντιδραστηρίων
The customer was developing an assay that required a biotin-labeled antigenic peptide for antibody capture. We synthesized a biotin-labeled peptide (Cys site-labeled) with purity >95% and biotin ligation efficiency >90%. Ο πελάτης καθιέρωσε με επιτυχία μια μέθοδο ELISA χρησιμοποιώντας πλάκα στρεπταβιδίνης με ευαισθησία πικογράμματος.
Μιλάτε για τις ανάγκες σας σε πεπτίδια με φθορισμό;
Είτε κάνετε κυτταρική απεικόνιση, ροή, FRET ή ELISA, εάν χρειάζεται να επισημάνετε πεπτίδια, μπορείτε να μιλήσετε μαζί μας.
Σας δίνουμε μια λεπτομερή προσφορά και σχόλια σκοπιμότητας εντός 24 ωρών.